Xây dựng và thẩm định phương pháp định lượng Pluthiophenol trong cúc tần

Abstract

Pluthiophenol là một hợp chất thuộc nhóm thiophen, được xác định là một trong những thành phần đặc trưng có mặt trong cây Pluchea indica. Hợp chất này được lựa chọn làm chất đánh dấu trong nghiên cứu định tính và định lượng P. indica. Trong nghiên cứu này, pluthiophenol đã được phân lập từ lá P. indica và định lượng bằng phương pháp sắc ký lỏng hiệu năng cao (HPLC). Quá trình phân tích được thực hiện trên cột Agilent Eclipse Plus C18 (4,6 × 250 mm, 5 µm) ở nhiệt độ 40°C, sử dụng pha động là hỗn hợp acetonitrile - acid phosphoric - nước (0,1%, v/v) theo chế độ rửa giải theo bậc (gradient). Tốc độ dòng được thiết lập ở mức 1,0 mL/phút, bước sóng phát hiện là 260 nm. Phương pháp phân tích đã được thẩm định theo hướng dẫn của ICH, bao gồm các tiêu chí: giới hạn phát hiện (LOD), giới hạn định lượng (LOQ), tính tuyến tính, độ chính xác và độ lặp lại. Quy trình phân tích sau đó được áp dụng để định lượng pluthiophenol trong 10 mẫu lá P. indica thu hái tại các thời điểm và địa điểm khác nhau trên lãnh thổ Việt Nam. Kết quả cho thấy hàm lượng pluthiophenol dao động từ 0,006% đến 0,041%.