Nghiên cứu một số yếu tố ảnh hưởng đến hoạt tính enzyme chitinase của vi khuẩn Lysobacter enzymogenes

Abstract

Trong nghiên cứu này, chúng tôi tiến hành đánh giá ảnh hưởng của một số điều kiện môi trường nuôi cấy vi khuẩn Lysobacter enzymogenes đến quá trình sinh tổng hợp enzyme chitinase, đồng thời khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến hoạt tính của enzyme chitinase thu nhận từ vi khuẩn này. Vi khuẩn Lysobacter enzymogenes được nuôi cấy trong môi trường gồm các thành phần: chitin huyền phù (swollen chitin) 5 g, (NH₄)₂SO₄ 4 g, CaCl₂ 0,25 g, MgSO₄·7H₂O 0,25 g, dung dịch vi lượng (trace element) 2 mL và pepton 1 g trong 1.000 mL nước. Enzyme chitinase được thu nhận bằng phương pháp ly tâm ở tốc độ 7.000 vòng/phút trong thời gian 15 phút nhằm loại bỏ cặn. Hoạt tính enzyme chitinase được xác định theo phương pháp DNS. Kết quả nghiên cứu cho thấy, vi khuẩn Lysobacter enzymogenes sinh tổng hợp enzyme chitinase tốt nhất trong điều kiện: nồng độ chitin huyền phù 1,00%, nguồn đạm bổ sung pepton 1 g/1.000 mL môi trường, thời gian thu nhận enzyme vào ngày thứ 5 của quá trình nuôi cấy, pH môi trường bằng 7 và tốc độ lắc 150 vòng/phút. Hoạt tính enzyme chitinase đạt giá trị tối ưu khi thời gian phản ứng là 60 phút, nồng độ cơ chất chitin huyền phù 1,00%, pH phản ứng 5,0 và nhiệt độ phản ứng 36°C.