Chuẩn hóa qui trình khuếch đại gen mã hóa protein tín hiệu, ứng dụng phát triển cảm biến sinh học nhận diện kháng sinh

Abstract

Đề tài được thực hiện nhằm phát triển qui trình khuếch đại gen mã hóa protein NanoLuc, protein tín hiệu sử dụng trong nghiên cứu phát triển cảm biến sinh học nhận diện kháng sinh. Qui trình chuẩn hoá bao gồm chuẩn hoá thành phần hoá chất và chu kỳ nhiệt. Qui trình tối ưu có thành phần hoá chất gồm 1X PCR buffer, 1 mM MgCl2, 200µM dNTPs, 0,1µM mồi T7 pro, 0,1µM mồi T7 ter, 1U Taq polymerase, 10 ng plasmid pET21a-Nluc và chu kỳ nhiệt như sau biến tính ở 94ºC trong 2 phút; lặp lại 30 chu kỳ cho 94ºC trong 30 giây, 57ºC trong 30 giây và 72ºC trong 1 phút; giai đoạn kéo dài ở 72ºC trong 5 phút.