Nghiên cứu biểu hiện và thử nghiệm hoạt tính kháng khuẩn của Lusin tái tổ hợp từ Phage staphylococcus Aureus

Abstract

Việc phát minh ra kháng sinh được xem là bước tiến vượt bậc của nền y học thế giới vào đầu thế kỷ 20. Trong sáu thập kỷ qua, 'thần dược' này đã đóng một vai trò quan trọng trong việc giảm gánh nặng toàn cầu về các bệnh truyền nhiễm. Tuy nhiên, trải qua thời gian, cùng với việc lạm dụng kháng sinh đã làm xuất hiện nhiều vi khuẩn kháng kháng sinh. Trước thực trạng kháng kháng sinh của vi khuẩn ngày càng gia tăng, việc sử dụng lysin bên cạnh liệu pháp thực khuẩn thể (phage therapy) để phòng và điều trị bệnh do vi khuẩn gây ra đang thu hút được sự quan tâm của các nhà khoa học trên toàn thế giới. Lysin hay còn được gọi là endolysin là enzyme thủy phân thuộc họ mureolytic enzyme có trong phage, có tác dụng ly giải thành tế bào vi khuẩn, giải phóng các phage con bằng phân cắt lớp peptidoglycan và cuối cùng giết chết vi khuẩn. Trong nghiên cứu này chúng tôi đã tách dòng và biểu hiện lysin K (LysK) được phân lập từ phage vi khuẩn tụ cầu vàng (Staphyỉococus aureus) trong vi khuẩn E. coti đồng thời đánh giá hoạt tính diệt S. aureus của lysin tái tổ hợp trên chủng vi khuẩn chị thị S. aureus 816. LysK được thiết kế trong vector biểu hiện pET32a(+) và cảm ứng biểu hiện ở nồng độ 0,5 mM IPTG, nhiệt độ 25°C, thu mẫu sau 6 giờ cảm ứng, LysK tái tổ được tính sạch bằng cột sắc ký ái lực ProBotid Nickel-Chelating Resin theo phương pháp tự nhiên. Kết quả thử nghiệm bằng phương pháp khuếch tán trên đĩa thạch cho thấy LysK tái tổ hợp có hoạt tính diệt S. aureus cao. Nghiên cứu này mở ra triển vọng sử dụng LysK tái lổ hợp nhằm thay thể hoặc bổ trợ kháng sinh trong điều trị S. aureus ở Việt Nam.