Biểu hiện dung hợp gen mã hóa kháng thể đơn chuỗi tái tổ hợp nhận biết kháng nguyên nhóm máu với Thioredoxin trong tế bào Escherichia coli

Abstract

Công nghệ biểu hiện kháng thể đơn chuỗi tái tổ hợp (scFv) đã được ứng dụng trong nghiên cứu, chẩn đoán và điều trị bệnh. Trong nghiên cứu trước, chúng tôi đã nghiên cứu biểu hiện kháng thể đơn chuỗi nhận biết kháng nguyên nhóm máu A (anti-scFv) trong tế bào Escherichia coli. Tuy nhiên, phân tử kháng thể đơn chuỗi dạng đơn được biểu hiện không tan gây khó khăn cho quá trình tinh sạch, tái cấu trúc và đánh giá hoạt tính. Trong nghiên cứu này, chúng tôi công bố kết quả nghiên cứu biểu hiện kháng thể đơn chuỗi tái tổ hợp nhận biết kháng nguyên nhóm máu ở dạng tan khi dung hợp với thioredoxin trong vector biểu hiện pET32a(+). Protein dung hợp Trx/antiA-scFv đã được tổng hợp trong tế bào E. coli với kích thước phân tử 49 kDa và chiếm khoảng 40% ở dạng tan. Kết quả này tạo thuận lợi cho nghiên cứu tối ưu sự biểu hiện dạng tan, thuận lợi cho tinh chế và xác định hoạt tính của anti - scFv tái tổ hợp.