Phân lập, tuyển chọn vi khuẩn nội sinh trong cây bướm bạc (Mussaenda philippica) có khả năng sản sinh polyphenol, flavonoid, kháng oxy hoá và kháng viêm.

Abstract

Đề tài thực hiện nhằm phân lập và tuyển chọn các dòng vi khuẩn nội sinh trong cây bướm bạc (Mussaenda philippica) có khả năng sản sinh polyphenol, flavonoid và kháng oxy hoá, kháng viêm. Quá trình phân lập và nhận diện sơ bộ các đặc điểm hình thái được 31 dòng vi khuẩn nội sinh trong bướm bạc (phân lập vi khuẩn nội sinh từ rễ được 8/31, cành 8/31, lá đài 6/31, lá 6/31, cuối cùng là hoa 3/31). Các dòng vi khuẩn R1.6, C2.2, LD3.1, LD3.5 được tuyển chọn có khả năng sản sinh polyphenol và flavonoid, với hàm lượng polyphenol được sản sinh lần lượt là 122,1±1,69 mg GAE/mL dịch ngoại bào, 148,4±1,74 mg GAE/mL dịch ngoại bào, 1,07±0,46 mg GAE/mL dịch ngoại bào, 99,41±1,64 mg GAE/mL dịch ngoại bào. Đối với hàm lượng flavonoid được sản sinh bởi các dòng vi khuẩn nội sinh lần lượt là 56,13±7,22 mg QE/mL dịch ngoại bào, 108,02±9,81 mg QE/mL dịch ngoại bào, 22,17±5,52 mg QE/mL dịch ngoại bào, 33,49±6,08 mg QE/mL dịch ngoại bào. Trong số 31 dòng vi khuẩn nội sinh được khảo sát hoạt tính kháng oxy hóa thì các dòng R1.6, C2.2, LD3.1, LD3.5 có kết quả dao động từ 1,25±0,02 đến 235,66±6,89 mg vitamin C/mL dịch ngoại bào. Khảo sát hoạt tính kháng viêm in vitro của các dòng vi khuẩn nội sinh R1.6, C2.2, LD3.1, LD3.5 lần lượt là 0,26±0,01 mg diclofenae/mL dịch ngoại bào, 0,35±0,01 mg diclofenae/mL dịch ngoại bào, 0,34±0,01 mg diclofenae/mL dịch ngoại bào, 0,36±0,01 mg diclofenae/mL dịch ngoại bào. Trong đó, bốn dòng vi khuẩn mạnh nhất gồm R1.6, C2.2, LD3.1, LD3.5 được tuyển chọn bằng cách khảo sát khả năng sản sinh hàm lượng polyphenol, flavonoid, kháng oxy và kháng viêm in vitro sẽ được nhanh chóng mang định danh bằng kỹ thuật PCR và giải trình tự vùng gen 16S rRNA. Kết quả giải trình tự cho thấy các dòng vi khuẩn R1.6, C2.2, LD3.5 có mức độ đồng hình với chi Enterobacter lần lượt là 99,88%, 100%, 99,89%; dòng vi khuẩn LD3.1 có mức độ đồng hình với chi Kosakonia là 100%.