Khảo sát đặc tính và tinh sạch enzyme protease từ Bacillus subtilis N1.

Abstract

Enzyme protease thu nhận được từ vi khuẩn Bacillus subtilis N1 có khả năng thủy phân cục máu đông fibrin trên cơ chất đặc hiệu là N-succinyl-Ala-Ala-Pro-Phe-p-nitroanilide. Do đó, để protease này có thế sử dụng và ứng dụng vào thực tiễn thì việc đánh giá độ tinh sạch, cũng như xác định các đặc tính cơ bản của chế phẩm enzyme cần được ưu tiên nghiên cứu và phát triển. Bắt nguồn từ những lí do trên, đề tài “Khảo sát đặc tính và tinh sạch enzyme protease từ vi khuẩn Bacillus subtilis N1” được thực hiện nhằm tiếp cận sâu hơn về nguồn enzyme protesae thu nhận từ B. subtilis N1, góp phần nâng cao độ tinh khiết và hoạt tính của enzyme trong những điều kiện tối thích. Mục tiêu nghiên cứu: Chọn ra phương pháp tinh sạch thích hợp cho enzyme protease, đồng thời xác định một số tính chất cơ bản của enzyme thu nhận được từ chủng vi khuẩn B. subtilis N1. Nội dung nghiên cứu: Xác định các đặc tính cơ bản của enzyme protease thu được từ dịch trích thô (pH, nhiệt độ tối ưu, độ bền pH và nhiệt độ); tinh sạch sơ bộ dịch enzyme thô bằng phương pháp tủa muối amonium sulfate; khảo sát các yếu tố ảnh hưởng đến phương pháp tinh sạch enzyme bằng hệ thống micelle đảo (Reverse Micellar System); xác định ảnh hưởng của một số ion kim loại và chất ức chế đến khả năng hoạt động của enzyme protease sau tinh sạch. Số liệu được thu thập và xử lý bằng phầm mềm thống kê SPSS 20.0, phân tích phương sai ANOVA và kiểm định Ducan để kết luận về sự sai khác giữa trung bình các nghiệm thức. Đối tượng nghiên cứu: Enzyme protease được thu nhận từ chủng vi khuẩn B. subtilis N1 thuần, từ bộ giống của Bộ môn Sinh lý-Sinh hóa, Khoa Nông nghiệp và Sinh học Ứng dụng, Trường Đại học Cần Thơ.