Phân lập vi khuẩn nội sinh trong cây Lan một lá (Nervilia fordii) có khả năng kháng oxy hóa và kháng viêm

Abstract

Đề tài thực hiện với mục đích phân lập và tuyển chọn các dòng vi khuẩn nội sinh trong cây lan một lá (Nervilia fordii) có khả năng kháng oxy hoá và kháng viêm. Quá trình phân lập và nhận diện sơ bộ các đặc điểm hình thái được 20 dòng vi khuẩn nội sinh trong cây lan một lá (phân lập được 6/20 dòng vi khuẩn nội sinh từ rễ, từ thân 4/20 dòng, từ lá 5/20 dòng và cuối cùng là từ củ 5/20 dòng). Các dòng vi khuẩn NF-R4, NF-S1 và NF-L1 được tuyển chọn có khả năng sản sinh polyphenol và flavonoid, hàm lượng polyphenol được sản sinh lần lượt là 38,23±0,42 mg GAE/mL, 35,29±0,64 mg GAE/mL và 35,05±0,50 mg GAE/mL dịch ngoại bào. Đối với hàm lượng flavonoid được sản sinh bởi các dòng vi khuẩn nội sinh lần lượt là 73,08±4,39 mg QE/mL, 70,69±5,65 mg QE/mL và 69,82±4,39 mg QE/mL dịch ngoại bào. Hoạt tính kháng oxy hóa của các dòng vi khuẩn nội sinh xác định thông qua các phương pháp phosphomolybdenum (TAC), năng lực khử sắt RP và trung hòa gốc tự do DPPH, trong số 20 dòng vi khuẩn thì các dòng NF-R4, NF-S1 và NF-L1 có kết quả dao động từ 1,10±0,02 đến 135,99±3,61 mg vitamin C/mL dịch ngoại bào. Ngoài ra, hoạt tính kháng viêm in vitro được khảo sát dựa trên hoạt tính ức chế sự biến tính của albumin huyết thanh bò, thu được kết quả của ba dòng vi khuẩn NF-R4, NF-S1 và NF-L1 lần lượt là 0,88±0,04 mg diclofenac/mL, 0,90±0,04 mg diclofenac/mL và 0,84±0,03 mg diclofenac/mL dịch ngoại bào. Theo đó ba dòng vi khuẩn tiềm năng được tuyển chọn tiến hành định danh bằng kỹ thuật PCR và giải trình tự vùng gen 16s rRNA. Kết quả cho thấy dòng vi khuẩn NF-R4 và NF-S1 có mức độ đồng hình với chi Bacillus sp. là 100%, dòng vi khuẩn NF-L1 có mức độ đồng hình với chi Enterobacter sp. là 99,86%.